Titulo: Relação da concentração da proAKAP4 em espermatozoides ejaculados e epididimários criopreservados de felinos domésticos (Felis silvestris catus) e avaliação da metilação do DNA em espermatozoides criopreservados de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus).

Doutorado

Hidalgo, Myrian Megumy Tsunokawa

2024.

Dois estudos foram conduzidos para investigar a importância da qualidade dos espermatozoides na fertilidade masculina. O primeiro estudo teve como objetivo avaliar a relação da proAKAP4 em espermatozoides criopreservados em felinos domésticos. Foram utilizados 15 gatos adultos, submetidos a colheita de sêmen por cateterização uretral e recuperação da cauda do epidídimo. Em seguida, foram realizadas análises espermáticas (cinética, concentração, morfologia, integridade de membrana) e as amostras foram criopreservadas. Após criopreservação foram realizadas novas análises espermáticas e a quantificação da proAKAP4. Foi observada uma maior concentração de proAKAP4 em espermatozoides ejaculados 30,43 ± 3,45 ng/mL (15,26-59,18 ng/mL) comparado aos epididimários 20,51 ± 1,87 ng/mL (12,15-35,36 ng/mL) (P=0,004). Foi possível observar relação da concentração da proAKAP4 com os parâmetros: MT (r2 = 0,660, P<0,001) e dance (r2 = 0,266, P = 0,049) no grupo ejaculado e relação com MT (r2 = 0,668, P <0,001) e células estáticas (r2 = 0,74, P = 0,003) no grupo do epidídimo, sugerindo que a concentração da proAKAP4 pode ser utilizada como biomarcador de motilidade. O segundo estudo teve como objetivo avaliar a metilação do DNA em espermatozoides criopreservados de tilápia do nilo. Foram utilizados seis machos, em que o sêmen foi colhido por massagem abdominal e em seguida, foram realizadas análises espermáticas (cinética, concentração, morfologia, integridade de membrana e metilação do DNA) e as amostras foram criopreservadas. Foi realizada a extração do DNA e a preparação das bibliotecas das amostras frescas e descongeladas. O estudo revelou que houve mudança no perfil de metilação do DNA em espermatozoides de tilápia do Nilo.